Desenvolvimento e validação de método analítico para quantificação de doxiciclina em plasma humano - doi:10.5020/18061230.2007.p193

Geysa Aguiar, Eunice Kazue Kano, Clarice Madalena Bueno Rolim, Cristina Helena dos Reis Serra, Humberto Gomes Ferraz, Valentina Porta

Resumo


O objetivo deste estudo foi desenvolver e validar método simples, rápido e sensível para determinação de doxiciclina em plasma humano por cromatografia líquida de alta eficiência
(CLAE). A doxiciclina e oxitetraciclina (padrão interno), foram extraídas de 0,5 mL de plasma com acetato de etila. Utilizaram-se o sistema de CLAE com bomba isocrática,
com temperatura controlada (30°C) e coluna cromatográfica Phenomenex® Luna C8 (15,0 cm x 4,6 mm; partícula 4 ?m). A fase móvel, constituída por mistura de água, acetonitrila
e tetrahidrofurano (80:15:5 v/v/v), teve pH ajustado para 2,5 sendo bombeada para o sistema cromatográfico em fluxo de 1,0 mL/min. Utilizou-se detector ultravioleta com
comprimento de onda de 357 nm. Investigaram-se os seguintes parâmetros de validação: especificidade, linearidade (r2 = 0,9946), precisão, exatidão, recuperação e estabilidade. O
limite de quantificação encontrado foi de 0,25?g/mL. Nas condições do ensaio, doxiciclina e oxitretaciclina apresentaram tempo de retenção de 7,5 e 2,4 minutos, respectivamente. Não
foram observadas interferências com compostos endógenos ou com anticoagulante. Obtevese recuperação média para doxiciclina de 84,57% e de 80,73% para o padrão interno na
concentração de 20 ?g/mL. O método mostrou-se preciso e exato tanto em análises realizadas no mesmo dia (intra-dia) quanto em dias diferentes (inter-dias). As amostras mantiveramse estáveis no tempo e condições de análise, por pelo menos 120 dias, à temperatura de -20°C, durante a injeção no cromatógrafo (24 horas) e quando analisadas após três ciclos de congelamento e descongelamento. O método desenvolvido demonstrou-se adequado à quantificação de doxiciclina em amostras de plasma humano, apresentando sensibilidade, precisão e exatidão dentro dos limites estabelecidos para análises deste tipo

Palavras-chave


Doxiciclina; Cromatografia Líquida; Plasma; Estudos de Validação.

Texto completo:

PDF


DOI: http://dx.doi.org/10.5020/1025

Métricas do artigo

Carregando Métricas ...

Metrics powered by PLOS ALM




Licença Creative Commons
Esta obra está licenciada com uma Licença Creative Commons Atribuição 4.0 Internacional.
Rev Bras Promoç Saúde, Fortaleza - Ceará - Brasil - e-ISSN: 1806-1230

Desenvolvido por:

Logomarca da Lepidus Tecnologia